TR-FRET Peptides
2017-10-23

  FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer)荧光共振能量转移是距离依赖的dipole-dipole反应,能量从起始被激发的工体分子转移到受体分子不产生任何光子。
  FRET多肽是标记着供体分子和受体分子(淬灭基团)的多肽。在大多情况下供体和受体对是两个不同的染料。如果受体分子是非荧光物质(淬灭基团)从荧光供体转移的能量被转变成分子共振。当FRET被终止时(将供体受体分开),可以检测到供体荧光增强。当供体和受体都是荧光物质时,被转移的能量以更长波长的光发散出来,这样供体和受体荧光的强度比例改变可以被检测到。为了有效的FRET淬灭发生,荧光基团和淬灭基团分子必须距离很近(~10-100 Å)并且淬灭基团的吸收光谱必须和荧光基团的发射光谱有所重叠。当设计供体-淬灭基团FRET系统时,需要仔细比对供体的荧光光谱和淬灭基团的吸收光谱。
  多肽标记着荧光供体和非荧光受体(淬灭基团),这两个基团由蛋白酶剪切序列隔开。在被酶水解后,含供体的多肽片段因为失去FRET而释放荧光。

acc5b8cdfe2ed849baff61b175e66fc7.gif  中肽生化在FRET多肽设计和合成上是全球的领导者
  Ø FRET设计合成的序列修饰
  Ø 选择合适的供体受体对
  Ø 提高FRET底物的溶解性和淬灭的有效性
  Ø 设计和合成TR-FRET多肽
  中肽有丰富的FRET多肽合成经验,提供全面的酶多肽底物:Aggrecanase, ADAMs, ACE-2, APCE, 2A protease, BACE1, Calpains, Carboxypeptidases, Caspases, Cathepsins, Chymopapain, Complement component C1s, CMV protease, ECE-1, Factor Xa, Furin, GranzymeK, HCV protease, HIV protease, HRV1, Kallikreins, Interferon alpha A, Lethal Factor Protease, Malaria Aspartyl Proteinase, MMPs, Pepsin, Plasmin, Plasmepsin II, Proteinases, Protein Tyrosin Phosphatase, Renin, SARS, TACE, Thrombin, TEV protease, Trypsin and West Nile Virus Protease。
  Time-resolved FRET(TR-FRET)peptide
  TR-FRET是一种利用长荧光寿命的荧光基团使得检测时间延长到50-150ms的方法。这种时间延长使得信号脱离大部分的短期杂散光干扰


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中肽生化提供用于HTS assay的Eu(III) chelate/ QSY-7 (Ex/Em=340nm/613nm) based TR-FRET peptide

中肽生化提供FRET设计各种各样的供体-受体对,包括灵敏度更好的长波长对。
  FRET多肽供体-受体对示例:


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      Mca/Dnp
       Ex/Em=380/460 nm
  Edans/Dabcyl
  Ex/Em=340/490nm
    5-FAM/CPQ 2
  Ex/Em=490/520 nm
  5-TAMRA/QSY-7
  Ex/Em=547/574nm
  Cy5/QSY-21
  Ex/Em=650/670 nm
  用于HTS assay的供体受体对


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      Eu(III) Chelate/QSY-7
  Ex/Em=340/613nm